পলিয়াক্রাইমাইড জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিসের জন্য সতর্কতা

· পলিয়াক্রাইমাইডজেল অবশ্যই অ্যাক্রিলাইমাইড মনোমর, পলিমারাইজেশন প্রারম্ভিক উপাদান, অনুঘটক এবং লবণ এবং বাফার মিশ্রণের ডান একসাথে।

· এক্রাইলামাইডএবং বিআইএস (এন, এন '- মিথাইলিন ডাবল অ্যাক্রিলামাইড) হ'ল মনোমার ফর্ম জেল ম্যাট্রিক্স।

· অ্যামোনিয়াম পার্সলফেট আঠালো পলিমারাইজেশন প্রক্রিয়া শুরু করুন। আঠালো গঠনের জন্য পানিতে প্রস্তুত 10% অ্যামোনিয়াম পার্সালফেট দ্রবণ প্রয়োজন। বেশিরভাগ তথ্য সক্রিয় ব্যবহারের প্রয়োজনের ইঙ্গিত দেয়। যাইহোক, 10% সমাধানটি উল্লেখযোগ্য ক্ষতি ছাড়াই বেশ কয়েক সপ্তাহের জন্য 4 at এ স্থাপন করা যেতে পারে। 10 মিলি পর্যন্ত তৈরি করুন এবং যখন আঠালো সমষ্টিতে ব্যর্থ হয় তখন তা বাতিল করুন।

টিপ: শতাংশের শতাংশএক্রাইলামাইডসিকোয়েন্সিংয়ে আঠালো এবং প্রোটিন আঠালো এক নয়। যদি প্রিমেড অ্যাক্রিলামাইড: বিআইএস সমাধান ব্যবহার করে তবে সঠিক বোতলটি নিশ্চিত করুন।

· টেমেড (এন, এন, এন ', এন'- টেট্রামেথাইল ইথাইলেনডিয়ামাইন) একটি অনুঘটক, একটি ব্রাউন বোতলে, রেফ্রিজারেটরে রাখা। আঠালো ing ালার ঠিক আগে যোগ করুন।

· পলিয়াক্রাইমাইড ইলেক্ট্রোফোরসিস ইলেক্ট্রোফোরসিসে ব্যবহৃত গ্লাস প্রতিটি সময় আগে এবং পরে ধুয়ে নেওয়া উচিত। ইলেক্ট্রোফোরসিসের পরে, গরম সাবান জলে নরম ব্রাশ এবং কাপড় দিয়ে ধুয়ে নিন, পাতিত জল দিয়ে ধুয়ে শুকনো হয়ে দাঁড়ান।

· আর্দ্রতা এবং ধূলিকণা ফাঁকা পলিমার দিয়ে কারণ হতে পারে। ইলেক্ট্রোফোরেসিসের আগে, কাচের প্লেটটি গ্লাস ক্লিনার দিয়ে পরিষ্কার করুন এবং এটি একটি নরম ব্রাশ দিয়ে মুছুন। পাতিত জল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন এবং একটি কাগজ মুছা দিয়ে ভালভাবে শুকিয়ে নিন। কাগজ দিয়ে মুছার আগে 70% ইথানল দিয়ে ধুয়ে ফেলা শুকনো পরিষ্কার এবং গতি বাড়াতে সহায়তা করে। এক্রাইলামাইডের ক্রমাগত নমুনা যুক্ত করুন: বিআইএস, জল, বাফার সলিউশন, অ্যামোনিয়াম পার্সালফেট, টেমেড। ভাল কাঁপুন এবং সঙ্গে সঙ্গে pour ালা।

পলিমারাইজেশনের আগে পলিয়াক্রাইমাইডকে হ্রাস করার প্রয়োজন হয় না। (এক্রাইলামাইড বুদবুদগুলি অপসারণের জন্য একটি ভ্যাকুয়ামে স্থাপন করা হত কারণ অক্সিজেন পলিমারাইজেশনকে বাধা দেয়))

অনুভূমিক আঠালো পয়েন্ট নমুনা টিপস।

Bother আরও স্পষ্ট দেখতে কিছু নমুনা গর্ত তৈরি করতে কালো কাগজের একটি টুকরো রাখুন, কালো পটভূমি।
· আঠালো ট্যাঙ্ক ভরা বাফার, ঠিক কলয়েডের উপরে।
· যদি প্রান্তটি আলো থাকে তবে লাইটগুলি চালু করুন, হালকা জ্বলজ্বল করুন কলয়েড। পাইপেটে নমুনা আঁকুন।
Pip স্বয়ংক্রিয় পাইপটিং ডিভাইস ব্যবহার করে।
· 10-200 এমইউ 1 লিকুইড মুভিং পয়েন্টে নমুনার বেশিরভাগ পয়েন্টে ব্যবহার করা যেতে পারে। খুব ছোট নমুনা গর্তগুলির জন্য (10μ1 এর চেয়ে কম), সিকোয়েন্সিং আঠালো জন্য ব্যবহৃত দীর্ঘ পাইপেট মাথাটি আরও সুবিধাজনক।

· পিপেটিং কেবল নমুনায় নিমগ্ন, ধীরে ধীরে চলমান তরল শ্বাসকষ্ট। নমুনাটি গ্লিসারিনের সাথে স্টিকি প্রদর্শিত হতে পারে এবং দ্রুত পাম্পিং পাইপের মাথার মধ্যে বায়ু বুদবুদগুলি আঁকতে পারে।

Pip পাইপেটিং হেড ইনহেলিংয়ের পরে নমুনাগুলি, পাইপের প্রান্তে তরল মাথাটি আলতো করে সরবে বা কাগজ মুছতে পারে ফোঁটাগুলির বাইরে তরল মাথা স্তন্যপান করে। নমুনা চুষতে না পারার বিষয়ে সতর্ক থাকুন।

নমুনা গর্তে নমুনা রাখুন

· পাইপটিং ডিভাইসটি সামান্য চাপ রাখতে, নমুনাগুলি কিছুটা ওভারফ্লো তরল মাথাটি সামান্য সরান।
Pp পিপেটিং মাথাটি বাফারে serted োকানো, স্পট গর্তের চেয়ে কিছুটা উঁচুতে, ইতিবাচক চাপ বজায় রাখে। পাইপেটের টিপটি একটি ছোট গর্তে .োকানো যেতে পারে।
· আস্তে আস্তে এবং অবিচ্ছিন্নভাবে নমুনাগুলি বেরিয়ে আসে। পাইপেট টিপটি বিন্দু নমুনা গর্তের উপরে স্থাপন করা হয়েছে, এবং নমুনাটি গর্তে ডুবে যাবে। নমুনাটিকে ধাক্কা দেওয়ার পরিবর্তে নমুনা গর্তটি পূরণ করতে ডুবতে দিন।
· একবার তরল মাথা দিয়ে নমুনার শেষ ড্রপ, তরল দ্বিতীয় লেগে চলে যাবে, আস্তে আস্তে তরল পদক্ষেপটি বাড়িয়ে তুলবে, বাফার থেকে বেরিয়ে আসবে

উল্লম্ব আঠালো নমুনা কীভাবে করবেন?

· উল্লম্ব আঠালো পয়েন্টের নমুনা গর্তগুলি কাচের দুটি টুকরোগুলির মধ্যে গঠিত। খুব পাতলা আঠালোতে, পাইপেটের মাথাটি দুটি কাচের প্লেটের মধ্যে এমনকি .োকানো যায় না। গ্লিসারিন দেখুন! নমুনা গর্তের উপরে পাইপেটের মাথা রাখুন এবং নমুনাটি গর্তে ডুবে যাবে।
· পয়েন্ট নমুনা আগে, পলিপ্রোপিলিন অ্যাকাইল জেল নমুনা গর্তের উল্লম্ব পয়েন্টটি পরিষ্কার করা নিশ্চিত করুন। নমুনা গর্তের নীচে প্রদর্শিত হতে পারে এমন আনপ্লিমারাইজড অ্যাক্রিলামাইড এবং জলটি ধুয়ে ফেলুন। জল নমুনা গর্তটি উল্লেখযোগ্যভাবে ছোট করে তুলতে পারে। একটি 25 মিলি বা 50 মিলি সিরিঞ্জ এবং একটি 18-গেজ সুই ব্যবহার করুন। ইলেক্ট্রোফোরসিস বাফারটি our ালা এবং সাবধানে নমুনা গর্তটি ফ্লাশ করুন।
Sample নমুনা গর্তটি দেখতে অসুবিধা হতে পারে তবে একইভাবে, বাকিগুলি সহজ। যদি অতিরিক্ত গর্ত থাকে তবে নমুনা বাফারটি ব্রোমোফেনল নীল দিয়ে পরীক্ষা করা যেতে পারে।